由于Elisa的操作步驟復雜，影響反應因素較多，在實驗問題中出現了一些大大小小的問題 。然而這些問題也都是可以避免的，熟練掌握之后就會簡單的多 。
OD值不正常是什么情況？是什么原因？
1.試劑盒未回溫（對應解決方法：試劑盒回溫到25℃）；2.溫度控制不好（對應解決方法：控制正確溫度）；3.孵育時間不準確（對應解決方法：控制孵育時間）；4.洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增加（對應解決方法：洗滌4-5次，每孔250ul ， 然后拍干）；5.陽光直射 ， 對著風直接吹（對應解決方法：避風避陽）；6.酶標儀的波長錯誤（對應解決方法：酶標儀的波長450nm）；7.抗體的稀釋錯誤（對應解決方法：正確的稀釋抗體）；8.水質問題（對應解決方法：用礦泉水代替） 。
ELISA檢測中OD值很低怎么辦第一種情況，整體的OD值偏低
可能情況分析：
1. 標準問題，標準濃度有沒有提高的潛力，標準曲線的擬合方式等2. 顯色試劑問題 ， 顯色試劑是否新鮮 ， 是否污染3. 檢測抗體，檢測抗體效價是否OK，保存方法是否合適，稀釋液中不含有蛋白質，基質中有影響酶活的物質等4. 體系中是否有其他影響抗原抗體結合的物質5. 孵育條件是否正確6. 洗滌不能過猛 ， 洗滌過猛也可能會造成顯色偏低
第二種情況，標準曲線OK，樣本的OD值很低
情況概述：操作步驟完全按照要求，樣本信息也適用，樣本類型血清，標曲OK，但就是樣本的OD值很低，不在曲線范圍內 。
可能情況分析：
1. 一般標曲OK，試劑盒基本沒有質量問題，這個時候先去分析樣品和保存方法的原因2. 樣品是否新鮮，小愛之前看到很多論壇大咖建議用新鮮樣品檢測，將標準品稀釋后加入血清或血漿中檢測（也就是血清進一步稀釋標準品），觀察檢測結果，判斷是否是血清中有未知物質影響3. 血清中成分復雜 ， 標準蛋白的稀釋液成分簡單，血清中可能有450nm顯色物質與板底非特異結合，或者有些非特異結合抗體的蛋白 ， 不能洗干凈，所以本底比標準樣品稀釋液高4. 適當延長顯色時間5. 更換酶標儀，排除儀器原因6. 聯系我們，嘗試其他方法

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【Elisa試劑盒OD值不正常的原因 od值是什么】

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